مقاله PCR زمان واقعی در مقابل PCR سنتی

PCR زمان واقعی در مقابل PCR سنتی

شرح

این آموزش به تکامل روش های سنتی PCR نسبت به استفاده از شیمی در زمان واقعی و ابزار دقیق برای سنجش کمی دقیق بحث میکند.

اهداف

این آموزش درک درستی ازموارد زیر ارائه میکند:

• محدودیتهای PCR سنتی
• مقدمه ای  بر PCR زمان واقعی
• مزایای استفاده از شیمی زمان واقعی نسبت به روشPCRسنتی

تکامل PCR به زمان واقعی

 PCR به طور کامل انقلابی در تشخیص RNA و DNA می باشد.

PCR سنتی از تشخیص در نقطه نهایی از واکنش به تشخیص در حالی که واکنش رخ داده است بهبود می یابد.

شکل 1: زمان واقعی تکامل PCR

PCR زمان واقعی در مقابل سنتی

 شیمی زمان واقعی برای تشخیص تقویت PCR در طول مراحل اولیه واکنش مجاز است. اندازه گیری سینتیک از واکنش درمراحل اولیه PCR مزیت متمایز نسبت به تشخیص PCR سنتی ارائه میدهد. روش سنتی از ژل آگارز برای تشخیص تقویت PCR در فاز یا نقطه نهایی از واکنش PCR استفاده میکند.

محدودیت ها از نقطه پایان PCR

ژل آگارز از نقطه پایان واکنش به دست آمده است. نقطه پایانی تشخیص بسیار وقت گیر است. نتایج ممکن است بعد از روزها بدست آید. نتایج بر اساس تمایز اندازه میباشد، که ممکن است بسیار دقیق باشد. همانطور که بعدا در بخش دیده می شود، نقطه پایان ازیک نمونه به نمونه است. در حالی که ژل ممکن است قادر به حل این اختلاف در عملکرد نباشد، PCR زمان واقعی به اندازه کافی برای تشخیص این تغییرات حساس است. رزولوشن ژل آگارز بسیار ضعیف است، در حدود 10 برابر است. PCR زمان واقعی می تواند کمی به عنوان یک تغییر دو برابر تشخیص داده شود.