پاورپوینت اندازه گيري اندكس هاي CBC

اسلاید ۱ :

هماتولوژی:

هماتولوژی علم مطالعه سلولهای خونی وانعقادی راشامل میشود.این دربرگیرنده بررسی غلظت،ساختمان وعملکردسلولهای خونی وپیش سازهای آنهادرمغزاستخوان،بررسی آندسته ازترکیبات شیمیایی پلاسمایاسرم که ارتباط نزدیکی باساختمان وعملکردسلولهای خونی دارندونیزبررسی عملکردپلاکتهاوپروتئینهای انعقادی است .

اسلاید ۲ :

هموگلوبین :

هموگلوبین یک پروتئین کونژوگه است که بعنوان وسیله ای برای انتقال اکسیژن ودی اکسیدکربن خدمت می کند.

درحالت اشباع کامل هرگرم هموگلوبین ۱/۳۴میلی لیتراکسیژن راحمل می کند.

یک مولکول هموگلوبین ازدوجفت زنجیره پلی پپتیدی (گلوبین)وچهارریشه پروستتیک (هم)که هریک ازآنهادارای یک اتم آهن فرواست،تشکیل یافته است.

• هنگامیکه هرریشه ”هم“بایک مولکول اکسیژن ترکیب می شودبه آن اکسی هموگلوبین(Hbo2)می گویند.
• هنگامیکه آهن هم اکسیدشده وبه فرم فریک تبدیل شودمتهموگلوبین (همی گلوبین Hi)تشکیل می شودکه قابلیت حمل اکسیژن یا دی اکسیدکربن راندارد.

اسلاید ۳ :

اندازه گیری غلظت Hb:

• روش سیان مت هموگلوبین (همی گلوبین سیانیدHiCN)روشی آسان وقابل دسترس بامحلول استانداردپایداراست.
• فری سیانیدپتاسیم هموگلوبین رابه همی گلوبیت سیانید(HiCN)تبدیل می کند.ترکیب آخری دارای طیف جذبی گسترده ایست که حداکثرآن در۵۴۰نانومتراست.
• محلول درابکین( تغییریافته ):
• فری سیانیدپتاسیم K3Fe(CN)6 ————–0.2gr
• سیانیدپتاسیم KCN———————-0.05gr
• 
  

اسلاید ۴ :

فسفات دی هیدروژن پتاسیم(بدون آب) KH2Po4—–0.14gr

دترژنت غیریونی(Sterox SEیاTriton X100)—–0.5-1ml

آب مقطر—————————————-تا۱۰۰۰ml

روش کار:

۲۰میکرولیترخون به ۵میلی لیترمعرف اضافه می شود(۱:۲۵۱)بخوبی مخلوط نموده وپس از۳دقیقه جذب نوری آن دربرابربلانک معرف در۵۴۰نانومتراندازه گیری می شود.

محاسبه : Hb(g/dl)=At/As*Cs/100*251

وجودپروتئینهای غیرطبیعی درپلاسما،هیپرلیپمی،افزایش شمارش لکوسیتها(بیش از۳۰هزار)یاوجودقطرات چربی ایجادکدورت کرده ومقدارHbرابطورکاذب بالانشان می دهند.

بسته بودن تورنیکت به مدت طولانی باعث غلیظ شدن خون وافزایش کاذب Hbمی شود.

خطاها:

۱-خطاهای ناشی ازنمونه

اسلاید ۵ :

۲-خطاهای ناشی ازوسایل

۳-خطاهای ناشی ازکاربر

۴-خطاهای ناشی ازروش کار

استفاده ازکووت نامناسب می تواندخطای عمده ای ایجادکند،استفاده ازکووت های Flow-throuhبهتراست.

خطاهای انسانی رامی توان باآموزش مناسب،درک اهمیت بالینی آزمایش،پیروی کردن ازدستورالعملهای کتبی وشفاهی وآشنابودن باتجهیزات ومنابع خطاکاهش داد.

خطاهادراثرخستگی افزایش می یابندومعمولادرنزدیکی انتهای روز کاری خطابیشتراست.

تکنولوژیستی که ذاتاونیزدراثرآموزش باحوصله ودقیق بوده وبه کارخودعلاقه مندباشدکمتردچارخطامی شود.

استفاده ازتجهیزات خودکارکه امروزه بطورگسترده مورداستفاده قرارمی گیرنداغلب خطاهای انسانی راحذف می کنند.

درروش سیان مت هموگلوبین همه مشتقات HbبهHiCNتبدیل می شوند.به استثنائ S Hb(سولفوهموگلوبین)

اسلاید ۶ :

هماتوکریت(PVC):

پیش ازبرداشتن نمونه خون برای آزمایشات هماتولوژی ،هم زدن کامل نمونه بسیاراهمیت دارد.

هماتوکریت عبارت است از نسبت حجم اریتروسیتهابه حجم کل خون وبه صورت %بیان می شود.

هماتوکریت خون وریدی باهماتوکریت خون مویرگی مطابقت داردوهردوی آنهابیشترازهماتوکریت توتال بدن هستند.

هپارین و(EDTA)ضدانعقادهای مناسب برای هماتوکریت هستند.

هماتوکریت رامی توان بطورمستقیم به وسیله سانتریفوژ نمودن به روش ماکرویا میکرو اندازه گیری نمودویابطور غیرمستقیم ازحاصلضرب MCVدرشمارش RBCمحاسبه نمودکه اینکاردردستگاههای خودکارشمارشگرانجام می شود.

چنانچه خون دردمای اتاق نگهداری شوددرفاصله ۶تا۲۴ساعت تورم اریتروسیتهاباعث بالارفتن MCVوHctمی شود.شمارش سلولی واندیسهادردمای ۴درجه سانتیگرادبه مدت ۲۴ساعت ثابت هستند.

روش میکرو:

اسلاید ۷ :

—وسایل:

—۱-لوله موئینه به طول تقریبا ۷سانتی مترباقطرداخلی یک میلی مترمورداستفاده قرارمی گیرد.

—۲-خمیرهماتوکریت

—۳-سانتریفوژهماتوکریت

—۴-خط کش

—لوله بایدحداقل ۵سانتیمترازخون پرشود.

—سانتریفوژکردن در۱۲۰۰۰ -۱۰۰۰۰gبمدت ۵دقیقه کافی است مگرآنکه Hctبیش از۵۰%باشدکه دراینصورت برای اینکه حداقل به دام افتادگی پلاسمادرلابلای گلبولهاایجادشودبهتراست ۵دقیقه دیگراضافه شود.

—Hctنشاندهنده غلظت گلبولهای قرمزاست ونه کل توده گلبول قرمز.

—درحاملگی به هیدرمی Hct کم می شوددرحالیکه توده کل گلبولهای قرمزجریان خون کاهش نیافته است.

—درشوک همراه باغلیظ شدن خون Hctممکن است نرمال ویاحتی بالا باشد،درحالیکه توده گلبول قرمزممکن است دراثرازدست رفتن خون به حدقابل توجهی کاهش یافته باشد.

اسلاید ۸ :

نتیجه هماتوکریت بلافاصله پس ازخونریزی ویاترانسفوزیون برای ارزیابی آنمی قابل اعتمادنخواهدبود.

منابع خطا:

۱-سانتریفوژ

۲-نمونه

۳-خطاهای انسانی

زمان وسرعت کافی سانتریفوژ نمودن برای بدست آوردن یک Hctصحیح  ضروری است.

باانجام سانتریفوژمقدارکمی لکوسیت ،پلاکت وپلاسمادرلابلای ستون گلبولهای قرمزباقی می ماند،خطای ناشی ازاین مقداربی اهمیت است.

درآنمی ماکروسیتیک،اسفروسیتوزوآنمی های هایپوکرومیک مقدارپلاسمای به دام افتاده اندکی بیشتراست ودرآنمی سیکل سل این مقداربازهم بیشترخواهدبود.

درمواردی که دستگاههای شمارشگربه وسیله روش میکروهماتوکریت کالیبره می شوند،توصیه می شودتصحیح مربوط به پلاسمای به دام افتاده انجام شود.

اسلاید ۹ :

وضعیت بیمار،فعالیت عضلانی وطولانی شدن زمان تورنیکت می تواندباعث تغییردرHctشود.

ناکافی بودن نمونه خون برای مقدارثابتی از EDTAبه دلیل چروکیده شدن سلولهاباعث کاهش کاذب Hctمی شودولی درمیزان Hbوشمارش سلولهاتاثیرندارد.

خوب هم نزدن نمونه ،نادرست خواندن سطح سلولهاوپلاسماوبه شمارآوردن لایه بافیکوت جزئ اریتروسیتها ازجمله خطاهای تکنیکی است.

درحالت مناسب دقت هماتوکریت باضریب تغییرات                           ۲CV±برابر۰٫۱است.درمقادیرهماتوکریت پایین به دلیل خطای درقرائت CVبالاترخواهدبود.

مشاهده ماکروسکوپی نمونه می توانداطلاعات ارزشمندی به مابدهد.

شمارش سلولها

قبلابه دلیل استفاده ازهموسیتومترتعدادسلولهادرمیلی مترمکعب بیان می شد(۱میلیمترمکعب =ml1/00003(،امروزه کمیته بین المللی استانداردسازی خونشناسی توصیه می کندکه واحدحجم بصورت لیتربیان شود،بعنوان مثال